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                    以下便是HE染色實驗時操作的要領

                    更新時間:2022-12-12      點擊次數:794
                     
                      HE染色實驗簡稱HE染色法,石蠟切片技術里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中zui基本、使用zui廣泛的技術方法。
                      HE染色實驗步驟:一般包含取材固定,脫水透明,浸蠟包埋,切片與貼片,脫蠟染色,脫水透明,封固等步驟。
                      HE染色實驗時的操作要領:
                      1、染色時調節pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,組織酸化而影響細胞核著色。因此,要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸水溶液中處理10-30min,這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
                      2、切片染蘇木精后,分色這一步是關鍵,應在顯微鏡下控制進行,一般以細胞核染色清楚(晰)而細胞質基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導致染色太淺,應重新染色后再行分色。
                      3、切片經酒精脫水后,入二甲苯時可出現白色不透明狀態,此為脫水不*,應將切片退回*,更換酒精、二甲苯,以求*脫水與透明。
                      4、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮、變形,影響神經元形態。
                      5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前,切片周邊均應擦干凈或吸干多余水分。
                      6、zui后封固時,要用中性樹脂,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,如漏出一部分不久將會褪色,所用樹脂濃度要適當,樹脂封固時不能有氣泡。
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